Fluoreszenz Markierung

Technologie

Die neuen Mikroskope der SeeNano-Reihe bieten eine neue Funktion, die in unserer vorherigen Reihe nicht verfügbar war - Fluoreszenz-Tagging.

Auf dieser Seite geben wir Ihnen ein Beispiel dafür, was wir mit dieser neuen Funktion in Kombination mit unserem Grayfield-Kontrastsystem erreichen können.

Originalproben von Riley/IUPUI

Centrosome Referenzbilder

Erster Versuch einer Fluoreszenzmarkierung

(Zum Vergrößern auf die Bilder klicken)

Weißlichtstimulus - unverändertes Bild,
Vergrößerung ≈ 3.000x

Vom Computer extrahiertes Bild - nur Weißlichtstimulus
Keine Filter - Vergrößerung ≈ 3.000x

Kompositum aus Weißlicht + computergeneriertem Bild
Vergrößerung ≈ 3.000x

Verwendung von Anregungs- und Emissionsfiltern

Zur Bestätigung der Fluoreszenzabbildung

Der SeeNano-Prototyp wurde modifiziert, um die Fluoreszenzfähigkeit hinzuzufügen:

Fluoreszenzfilterhalter für die Filterung von Anregung und Emission hinzugefügt
Hinzufügen einer Quecksilberlichtquelle für die Fluoreszenzstimulation, die mit der LED-Lichtquelle für die Weißlichtbeleuchtung umschaltbar ist
Erhebliche Unterstützung in Bezug auf Verfahren und kritische Überlegungen von der Universität Hamburg, die auch mit Fluorophoren infundierte Lebendzellproben für Experimente zur Verfügung stellte.

Die Proben von der Universität Hamburg waren mit GFP-Fluorophoren infundierte Peroxisomen.

Die auf dem SeeNano Prototyp verwendeten Filter waren:

Anregung: Edmund Optics 51022x EGFP
Emission: Edmund Optics 51022m EGFP

Nikon Bild einer Peroxisom-Probe

Abgebildet mit: Nikon A1 Konfokales Lasersystem, zur Verfügung gestellt von der Universität Hamburg

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DIC (Rohbild)
Vergrößerung ≈ 1.000x

Fluoreszenz gescanntes Bild
Vergrößerung ≈ 1.000x

Zusammengesetztes verarbeitetes Bild
Vergrößerung ≈ 1.000x

SeeNano Bild einer Peroxisom-Probe

Abgebildet mit: SeeNano Prototyp Grayfield Mikroskop System

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Phasenkontrast-Rohbild
Übertragungsmodus, Lichtquelle: WL=LED, Wide Field Capture
Vergrößerung ≈ 2.500x

Fluoreszenz verarbeitetes Bild
Transmissionsmodus, Lichtquelle: FL=Hg, Wide Field Capture
Vergrößerung ≈ 2.500x

Composite Raw PC+Verstärkte Fluoreszenz
Transmissionsmodus, Lichtquelle: FL=Hg und WL=LED, Wide Field Capture
Vergrößerung ≈ 2.500x

Phasenkontrast-Rohbild
Übertragungsmodus, Lichtquelle: WL=LED, Wide Field Capture
Vergrößerung ≈ 2.500x

Fluoreszenz-Rohbild
Transmissionsmodus, Lichtquelle: FL=Hg, Wide Field Capture
Vergrößerung ≈ 2.500x

Komposit Rohfluoreszenz + weißes Licht
Transmissionsmodus, Lichtquelle: FL=Hg, WL=LED, Wide Field Capture
Vergrößerung ≈ 2.500x